大肠杆菌实验的具体步骤

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/07 06:39:50

大肠杆菌实验的具体步骤
大肠杆菌实验的具体步骤

大肠杆菌实验的具体步骤
大肠杆菌测定
1、将上述的EC肉汤管继续培养24h,取其产气管的培养物划线接种于伊红美蓝((EMB)板,36士IC培养24士2h.
2、检查平板上有无具黑色中心有光泽或无光泽的典型菌落.
如有典型菌落,则从每个平板上至少挑取2个典型菌落;如无典型菌落,则从每个平板上至少挑取2个可疑菌落.用接种针接触菌落中心部位.移种到营养琼脂斜面上,36士1℃培养18-24h,
将斜面培养物移种到下列培养基中进行生化试验.
3、一色氨酸肉汤:在36士1℃培养24士2h后,加Kovacs氏试剂.2-0.3mL,上层出现红色为靛基质阳性反应.
4、 MR-VP培养基:在 36士1℃培养48士2h.以无菌操作移取培养物 1mL至 13mX 100mm试管中,加5%.一蔡酚乙醇溶液0.6mL,40%氢氧化钾溶液 0.2mL和少许肌酸结晶,振摇试管后静置 2h,如出现伊红色,为 VP试验阳性.将MR-VP培养物的剩余部分再培养48h滴加5滴甲基红溶液.如培养物变红色,为甲基红试验阳性,若变黄色则为阴性反应.
5、Koser氏拘椽酸盐肉汤:于36士1C培养96h记录有无生长.
6、 LST肉汤:于36士1℃培养48士2h,观察试管中是否产气.
7、革兰氏染色:取 18h营养琼脂斜面培养物作革兰氏染色.大肠杆菌为革兰氏阴性.

2、发酵培养基准备：摇瓶的话好说，灭菌锅就行。发酵罐的话，要先将罐子清洗干净，然后配料，然后灭菌。 3、将培养好的种子液，按一定的接种量接到发酵

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