用pcDNA3.1(+)作为表达载体,设计PCR引物时怎么能保正不移码?起始密码子前的碱基个数应该是多少?

用pcDNA3.1(+)作为表达载体,设计PCR引物时怎么能保正不移码?起始密码子前的碱基个数应该是多少? pcdna3.1作为载体的重组质粒转入大肠杆菌怎么检测筛选酶切了hindⅢ和EcoRⅠ, 质粒转染细胞不表达的问题~想研究某跨膜蛋白,构建真核表达质粒（构建了多种,载体有PCDNA3.1-FLAG,PCDNA3,1-V5,PCMV-5'端MYC,PCDNA3-5'FLAG,PCDNA3-5'HA）,转染始终不表达,细胞换过293T,AD293,COS1,COS7等,转染操 如何向PCDNA3.1 载体上加入FLAG标签? 用pcDNA3.1在哺乳动物细胞里表达蛋白,从转染开始算,多长时间可以表达出目的蛋白呢~ 载体是pcdna3.1,感受态可以用哪种?有没有特别的限制? 用pCDNA3.1+质粒,设计单载体单启动子,共表达抗体轻重链实验方案如题,这就是老板布置的任务,还说有一些方法就是可以单启动子共表达轻重链.我看过一些嵌合抗体构建的文献,基本上都是用的 使用pcDNA3.1载体转化大肠杆菌后,如何进行筛选?如题：追加20-30分使用pcDNA3.1载体转化大肠杆菌后,如何进行筛选（筛选转化后的大肠杆菌）? 本人实验,现在手上有pCDNA3.1-EGFP载体,现在想在载体上插入目的基因PTEN片段,应该怎么做? cos-7细胞是真核还是原核细胞?如果要转染入这个细胞的话,构建的质粒必须是pcDNA这个载体吗?另外请问这个 pcDNA3.1 /CT-GFP-TOPO是什么意思?如何翻译?如果要转染进COS-7细胞的话如何选择表达载体 pcDNA3.1和pcDNA3 有什么区别么? 请问表达蛋白时对载体质粒有要求吗,我要做原核表达,现有很多质粒可作为载体,如PET32a和PGEX4t-1,如何选 我构建了一个基因的真核表达载体,转染293T细胞后以空质粒PCDNA3.1及未转染质粒的孔为对照,还有一个以PBS代替一抗的未转染质粒的孔为对照,结果只有PBS代替一抗的孔未被染色,其余孔都被染色 pcDNA3.1的多克隆酶切位点有哪些 老师布置了关于寻找猪肿瘤坏死因子a的基因序列并设计引物表达蛋白,本人完全不会,1.找到猪肿瘤坏死因子a的基因序列；2.用原核（Pet24a）,酵母（ppiczalpha）和真核系统（pcDNA3.1）表达蛋白,设 PGEX系列表达载体的特点我在用其他载体做表达的时候出现了一点问题,有人建议我用pegx系列的载体试一试,请问一下PGEX 系列表达载体有什么特点,在原核中表达，我设了5个iptg浓度，以及4个时 为什么研制单克隆抗体时,常用半抗原-载体蛋白1作为免疫用抗原 1.作为基因工程表达载体,只需含有目的基因就可以完成任务吗?为什么?