氨基酸的纸层析分离原理是什么?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 06:21:14
氨基酸的纸层析分离原理是什么?

氨基酸的纸层析分离原理是什么?
氨基酸的纸层析分离原理是什么?

氨基酸的纸层析分离原理是什么?
纸层析法(paper chromatography)是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术,可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定.纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法,其中滤纸纤维素上吸附的水是固定相,展层用的有机溶溶剂是流动相.在层析时,将样品点在距滤纸一端约2~3cm的某一处,该点称为原点;然后在密闭容器中层析溶剂沿滤纸的一个方向进行展层,这样混合氨基酸在两相中不断分配,由于分配系数(Kd)不同,结果它们分布在滤纸的不同位置上.物质被分离后在纸层析图谱上的位置可用比移值(rate of flow,Rf)来表示.所谓Rf,是指在纸层析中,从原点至氨基酸停留点(又称为层析点)中心的距离(X)与原点至溶剂前沿的距离(Y)的比值:
在一定条件下某种物质的Rf值是常数.Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、温度、湿度、层析滤纸的型号和质量等因素有关.
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原理是根据物质的分子大小、吸附能力、亲和力、分配系数等物理化学性质的不同,使得样品各组份以不同的比例分布在两相中,一个为固定相,一个为流动相,当流动相流经固定相时,各组分以不同的速度流动,达到分离的目的。