关于亲和层析EDTA和咪唑都可以和柱子上挂的金属离子结合,那为什么EDTA是把金属离子洗下来而咪唑只是竞争性地结合在上面呢?先谢谢一楼的回答..不过你貌似回答的不对哦..我就举个例

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/27 07:17:04
关于亲和层析EDTA和咪唑都可以和柱子上挂的金属离子结合,那为什么EDTA是把金属离子洗下来而咪唑只是竞争性地结合在上面呢?先谢谢一楼的回答..不过你貌似回答的不对哦..我就举个例

关于亲和层析EDTA和咪唑都可以和柱子上挂的金属离子结合,那为什么EDTA是把金属离子洗下来而咪唑只是竞争性地结合在上面呢?先谢谢一楼的回答..不过你貌似回答的不对哦..我就举个例
关于亲和层析
EDTA和咪唑都可以和柱子上挂的金属离子结合,那为什么EDTA是把金属离子洗下来而咪唑只是竞争性地结合在上面呢?
先谢谢一楼的回答..不过你貌似回答的不对哦..我就举个例子,比如sepharose上挂了镍,然后带HIS标签的蛋白与镍结合.那么咪唑是洗下与金属结合的蛋白质..而EDTA就直接把镍从sepharose上洗下来了...我想问的是咪唑和EDTA既然都是与金属螯合..那这种应用在柱子上的差异是因为什么原因产生的呢?

关于亲和层析EDTA和咪唑都可以和柱子上挂的金属离子结合,那为什么EDTA是把金属离子洗下来而咪唑只是竞争性地结合在上面呢?先谢谢一楼的回答..不过你貌似回答的不对哦..我就举个例
看了你的补充,总算明白你的困惑是什么了.
蛋白质和镍的结合只是比较松散的结合,只是一种竞争性的结合,但不能彻底使蛋白质变性,具体情况你可以看看生物化学书里的有关竞争性抑制剂的内容
1.EDTA可以和金属离子螯合成稳定(注意是稳定,表示基本很难分离)的化合物,换另一种说法就是,EDTA与金属离子的结合比柱子材料与金属离子的结合能力强,所以EDTA与金属离子结合而从柱子上脱落,表现出来的情况就是EDTA能把金属离子洗下来.EDTA可是著名的螯合剂哦,几乎常见的金属离子它都能与之螯合.所以EDTA把镍+蛋白质洗下来是螯合作用,EDTA与镍螯合,顺带连着蛋白质一起洗脱
2.但咪唑的情况不一样,这里就是竞争性的问题了(还是建议你去看看竞争性抑制剂的内容)
咪唑和镍相比,咪唑与蛋白质的结合能力更强,但咪唑无法与镍结合(或是螯合、总之是个反应)所以咪唑洗下的是蛋白质而不是蛋白质+镍
如果还不明白可以给我发信

厉害!

不太懂,

关于亲和层析EDTA和咪唑都可以和柱子上挂的金属离子结合,那为什么EDTA是把金属离子洗下来而咪唑只是竞争性地结合在上面呢?先谢谢一楼的回答..不过你貌似回答的不对哦..我就举个例 亲和层析和反向层析的关系 谷胱甘肽亲和层析法主要用于分离哪些蛋白质那谷胱甘肽亲和层析法的原理是什么?谷.不是一个配基吗?可以和大部分蛋白结合吗? 亲和层析的原理和步骤是怎样的?你认为哪些问题可能影响亲和层析的效果? 亲和层析的原理 咪唑是否是胺类的?咪唑与胺类物质在结构和性质上的区别? 咪唑和吡唑上N的不同点做计算化学时用N203和吡唑还有咪唑反应.发现二者结果差异很大,吡唑:-NO在两个N上都可能取代.咪唑:在4位或者5位的C上取代.咪唑的结果我比较理解原因,应该是亲电 层析的反向加压阀的作用在蛋白质分离的层析(色谱)设备上,反向加压阀的作用是什么?能否减少气泡、柱床压力和提高柱子的分辨精度 亲和层析的操作步骤? 什么是t-Pa亲和层析 亲和层析的基本原理是什么? 请问亲和层析原理是什么 亲和层析的基本原理是什么? 咪唑啉和咪唑是一种东西吗 薄层层析和纸层析的异同 关于纸层析法什么是上升纸层析法和径向纸层析法?那径向层析法中最外面的圈就是溶解度最大的吗? 关于色谱层析DE52上柱体积和上样量的关系.我要蛋白过柱子,不知道DE的上样量是多,看了有些资料上说上样量也不宜过大,一般为柱床体积的1-5%为宜,又说样品的加量与DEAE―纤维素有一个最适 镍离子亲和柱纯化蛋白的洗脱液和平衡液怎么配?我第一次做蛋白,请尽量说详细点我手上只有一个笔记,是这样写的平衡液:50mM 磷酸钠 300mM氯化钠洗脱液:150mM咪唑具体的洗脱的步骤都有,1.平