为什么PCR跑不出来,都弥散了

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/04/28 22:05:46

为什么PCR跑不出来,都弥散了
为什么PCR跑不出来,都弥散了

为什么PCR跑不出来,都弥散了
“从头拖到尾,另外一对引物就能做出来”
说明不是引物之间形成二聚体,而是第一对引物的设计有问题（特异性很差）.如果一定要扩增那个区,建议引物的位置向两边放一放.如果你没有好的设计软件,建议到Primer3去试试（目前最好的免费引物设计）.
如果还是不行,把序列发给我,我帮你设计（我有专业软件,ABI primer express 3 和 Invitrogen Vector NTI 10)

PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时，所有样都不出现条带，而是弥散状的，从投拖“从头拖到尾，另外一对引物就能做出来”说明不是引物之间形成二聚体，而是

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弥散的原因比较多：
1、PCR产物是否在扩增结束后立即进行电泳，电泳液是否是新鲜的，如果不是很可能导致扩增产物降解。
2、PCR体系没摸索出来，用正交试验找出正确的PCR体系，不要单纯根据别人的试验资料去做，不要太相信文章中的数据，谁都会保护自己的试验结果和数据的。
3、扩增所用的引物设计的不好，找别人帮你看看，或者找生物公司帮你设计。如果是通用引物也要确定你所要扩增的基本是高度保守的。
4、模板的问题，你用的模板是否降解了。是DNA做模板，还是RNA做模板。
最后，如果你扩增初的是多条带那就可能是引物特异性不强或者退火温度太低。如果你在摸索完条件后还是出现完全是弥散的现象建议最好换引物。

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为什么PCR跑不出来,都弥散了 PCR摸引物的退火温度,跑胶为什么整个泳道都弥散了,还有marker为什么跑的不好,18孔10ul 我的PCR条带弥散,阴性对照也弥散,但是不加引物不弥散,当然也没有条带,请问都是什么原因啊? 为什么我的RT-PCR内参跑不出来.目的条带到是跑出来了如何消除PCR的拖尾PCR扩增出来有目的条带,但是有拖尾,呈弥散片请问你的PCR问题后来怎么解决的PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时，所有样都不出现条带，而是弥散状的，从头拖到尾，而maker却是好的，说明不是电泳的问题，我把所有的酶，buffer,Mg+都换了一为什么PCR突变后转化不出来呢? pcr结果一半出来一般出不来是为什么?前几天跑了三次pcr,结果电泳除了marker什么都没有,昨天跑6个样加阴性阳性,可是前4个样品出来,后2个样品和阴性阳性什么都没有,就好像没有放入pcr仪器一 PCR实验P不出来 PCR结果呈弥散状是什么原因造成的我上个星期跑完PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都【求助/交流】PCR得弥散带是怎么回事肝脏组织中atf2 基因cDNA的PCR程序快纠结死我了,我用以下程序跑电泳出来的结果几乎总是弥散,看不到目的条带.F:CCGAGATCTatgagtgatgacaaaccctttctat 有BGI2 酶切位点G:CCGGTTAACtcaacttcctgagggctgtg 有HPA1 酶切位 PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都换了一遍了还是找不到原因,结果照旧,重新合成了 RT PCR为何都要跑电泳,在PCR的时候为何要加内参?是为了判断是否是PCR过程中出现问题?内参跑不出来而cDNA能跑出来是怎么回事,相反又是怎么回事? pcr引物退火温度55度时不行,58度可以,为什么在做PCR时,引物用55度的退火温度扩不出来,而用58度却扩出来了,为什么 PCR结果没有条带,都是弥散的,这是为什么前几次做的结果都挺好的,条带很清楚,亮度也可以,就是不太齐,但是最近几次几乎没有目的带,都是弥散的,从头到尾,我用的东西都是一样的,条件也没变 DNA琼脂糖凝胶电泳marker跑了两次不出来什么原因?提纯质粒后跑胶,marker跑了两次不出来,目的条带出来了但是很弥散.怀疑是胶的原因,1%的胶,EB加了3ul,以前加这个量和同样地配胶方法目的条带 PCR扩增不出来条带的原因?