PCR有杂带怎么办?我的PCR做出来有很多杂带,而且很亮,目的条带却很暗,阳性对照没问题,能批出来,说明引物没问题,到底是怎么回事?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/03 20:56:41
PCR有杂带怎么办?我的PCR做出来有很多杂带,而且很亮,目的条带却很暗,阳性对照没问题,能批出来,说明引物没问题,到底是怎么回事?

PCR有杂带怎么办?我的PCR做出来有很多杂带,而且很亮,目的条带却很暗,阳性对照没问题,能批出来,说明引物没问题,到底是怎么回事?
PCR有杂带怎么办?
我的PCR做出来有很多杂带,而且很亮,目的条带却很暗,阳性对照没问题,能批出来,说明引物没问题,到底是怎么回事?

PCR有杂带怎么办?我的PCR做出来有很多杂带,而且很亮,目的条带却很暗,阳性对照没问题,能批出来,说明引物没问题,到底是怎么回事?
在你现有的退火温度上各增加三度,降低三度,都去试一下先;如果杂带的长度比目的带长的话,就适当缩短退火和延伸时间.

可以提高温度试试

总的来说,是引物特异性不好,你的引物是不是太短了?
提高退火温度试试,1度1度提升
另外,试试热启动,低温下容易生成非特异条带,第一个循环还是很重要的。

1. raise annealing temperature.
2. try new primer(s).

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